>> По телевизору можно наблюдать как целуют икону и стоит поп с тряпочкой, размазывает слюни.
это сейчас протирают тряпочкой, смоченной в дезинфицирующем растворе. ТОГДА этим никто не занимался. а скажи такое попу — еретиком объявят.

Википедия утверждает, что в 78-82, возможно в зависимости от региона. В Прибалтике в 77 еще делали, летом 78 уже нет.

Оспа, это 100%.
Копипаста.

«Легочная чахотка (туберкулез) — самая распространенная и наиболее часто встречающаяся болезнь». В XIX веке каждый седьмой житель Европы умирал от чахотки, а по менее развитым странам статистики просто не существует.

Лепра развивается от трех до сорока лет. Обходились с прокаженными соответственно: с раннего Средневековья упаковывали в лепрозории, которых в Европе были десятки тысяч.

До конца XVI века эта болезнь не имела собственного названия, так как ее не отличали от проказы.
«Французская болезнь» косила людей, одно время она даже стала главной причиной смертности. В начале XX века сифилисом болели целые уезды, а в русской армии был поражен каждый пятый.
Булгаков хорошо описывал причины, общая посуда, стеснённость.
По телевизору можно наблюдать как целуют икону и стоит поп с тряпочкой, размазывает слюни.

Раньше корью болел чуть ли не каждый ребенок. Умирали при этом от 1 до 20% в зависимости от питания. Одно лишь добавление больным витаминов снижало смертность вдвое.

Эболу пилить не нужно, намного проще добыть готовую в естественной среде обитания.

Ну пусть 10%, и чого?… 3 раза сшить, почистив = 8 кусков.
А ДНК и надо-то на десяток рабочих частиц, дальше — само. ВАС — так потом с рестриктзами играться, или петли теми же лигазами вшивать… Муторно.

С тем, что оспа для террористов неоптимальна согласен, я это уже писал в «дисклэймере» про «открытый доступ» 🙂 Но в первую очередь из за сложности, с эффективностью — порядок.
Пока вакцину наработают, да пока она сработает — миллиончиков… немало загнуться могут. Оспа доказано пандемична, в отличие от той же Эболы…
Лечить-то её особо нечем, да и прививаться в разгар эпидемии поздновато. Можно антисенсами какими-нить морфолиновыми, или тупо антителами лечить — но их ещё тоже наработать и распространить надо.

Армии прививают на случай войны, а у террора цель другая. Пока спасет то, что те кто могут — не хотят, а те кто хотят — не могут :).

У лучшей коммерчески-доступной лигазы (сшивает куски ДНК), которую мы смогли найти, эффективность что-то около 10%. 10 кусков сшить ещё можно, но сомнительно, что выход будет сколь-либо заметный. Так что на практике только BAC.

Вообще, для биотеррориста оспа — это не такая уж сильно удобная вещь. В случае чего всем просто быстро поставят прививки от оспы и эпидемия быстро кончится. Кроме того, войска многих стран от оспы как раз на такой случай уже привиты.

Так никто не заставляет одним куском реплицировать… Сшить 10 кусков — не рокет саенс.

Вот то, что упаковка к репликационной вилке у оспы привязана — это я не знал, это хуже. Надо разбираться, как обойтись минимальным геморроем.

Ну как — «хуже»… Иначе б уже кто-нить сварил, наверно 🙂

ПЦР с большим трудом работает на молекулах в 20 килобаз длиной. Мы на это наткнулись из-за того, что у нас почти у одних в индустрии протокол с такими длинными молекулами работает.

Более 20 килобаз ПЦР-ить уже вообще нереально — ДНК будет гнуться, заворачиваться в клубок, химериться, self-prime’иться и делать множество других интересных вещей. Потому для размножения больших кусков ДНК используют BAC (Bacterial Artificial Chromosomes) — закольцовывают ДНК, метилируют и вставляют в бактерии. Ну а потом аккуратно культивируют их.

Но чистый вирусный ДНК так размножить не получится, так как бактерии размножать ДНК с hairpin loop не умеют. Если попробовать взять кольцевой ДНК и вставить в клетки с другим типом оспы — может что-то получиться, но очень сомнительно. Так как упаковка в капсид — это вообще очень сложный процесс, там одновременно идёт репликация и заворачивание в специальные вирусные белки.

Репликация-то там не проблема вообще — вносим внешнюю, ПЦР никто не отменял. ДНК есть, её только упаковать надо.
Вот насчёт хитростей упаковки в капсид — я не в курсе, поделитесь вкратце чем этот вирь такой замысловатый, что самосборка не работает в присутствии всех белков?…

Ретровирусы — не наш выбор, медленно это и печально.

Я могу сказать точно, что из всех этих методов точно не сработает заражение одной клетки коровьей оспой и собранным ДНК от настоящей оспы. Там слишком сложный механизм реплицирования и упаковывания в капсид.

Более вероятной кажется возможность использования ретровирусов (аденовирусы, например) в качестве векторов с генами настоящей оспы. Они будут встраиваться, в том числе, и в вирусную ДНК. Это в природе с ДНК-вирусами случается иногда.

Ну а потом долго и упорно продвигать геном, отбирая более удачные варианты в сторону натуральной оспы. Теоретически возможно, но потребует сотни мегабаксов.

Насчёт открытого доступа — это всё в открытом академическом доступе и так давно есть.